日期:2020/5/26瀏覽:924次
摘要:本文敘述一種新的發(fā)酵液過濾技術(shù)。對放線菌與霉菌發(fā)酵液,采用 “精密微孔過濾”或采用“助濾 + 精密微孔過濾”;對細菌發(fā)酵液,采用“絮凝 + 助濾 + 精密微孔過濾”;對含少量蛋白質(zhì)的發(fā)酵濾液復(fù)濾,采用“助濾 + 精密微孔過濾”。這種過濾技術(shù),不僅適宜發(fā)酵濾液除菌渣過濾,適宜發(fā)酵液去除殘留菌體與不溶性蛋白質(zhì)的復(fù)濾,也適宜于染菌罐批的過濾。絮凝方法選擇,助濾劑種類,投加量與助濾方法的選擇及微孔過濾機結(jié)構(gòu)的選擇,應(yīng)根據(jù)發(fā)酵液性能,處理量與處理要求而定,均需通過系統(tǒng)試驗與嚴密計算。
關(guān)鍵詞:發(fā)酵液 濾液精密復(fù)濾 精密微孔過濾 助濾劑
發(fā)酵液的過濾與濾液的進一步復(fù)濾是發(fā)酵產(chǎn)物提取工藝中一步很重要操作,它直接關(guān)系產(chǎn)品的質(zhì)量、收率、成本與勞動生產(chǎn)率。目前國內(nèi)普遍采用手動板框壓濾機,該設(shè)備操作簡單,投資省,但是濾液質(zhì)量不高,濾布消耗量大,操作落后,少數(shù)廠采用帶式過濾機,連續(xù)過濾 , 生產(chǎn)能力大,但濾液質(zhì)量不高;還有一些發(fā)酵液,采用不過濾工藝,直接進行離子交換,這方法往往影響產(chǎn)品質(zhì)量與收率,工業(yè)發(fā)達國家普遍采用“帶微調(diào)刮刀的硅藻土預(yù)涂的真空轉(zhuǎn)鼓式過濾機”,因硅藻土的消耗與動力消耗非常大,機械龐大,價格貴,國內(nèi)難以普遍推廣。研究開發(fā)出適宜國內(nèi)發(fā)酵企業(yè)能應(yīng)用,過濾效率高,操作較簡單,投資費與操作費較低的新型發(fā)酵液過濾技術(shù),一直是我們多年的努力目標,經(jīng)過反復(fù)研究,開發(fā)出一種以精密微孔管為主的新的發(fā)酵液過濾方法。
1 、 發(fā)酵液過濾的特點:
發(fā)酵液是非牛頓型液體,成份復(fù)雜,除了代謝產(chǎn)物、菌絲體,還有培養(yǎng)基殘渣、消沫劑等,與其它物料相比,發(fā)酵液過濾有如下特點:
1.1 發(fā)酵液的過濾性能變化大。由于生物反應(yīng)與代謝過程復(fù)雜,同一條件下產(chǎn)生的發(fā)酵液,今天與明天的過濾性能都有很大的差異,即使同一罐放罐的發(fā)酵液,由于菌絲的自溶,其過濾性能也在變化。自溶愈多,過濾愈難。
1.2 發(fā)酵液過濾濾渣的粘性大:不僅渣與渣的粘性大,與過濾介質(zhì)的粘性也很大,這粘性不僅使過濾阻力增加,而且使濾渣從過濾介質(zhì)上脫離與過濾介質(zhì)的清洗非常困難。
1.3 發(fā)酵液中的膠狀物含量高,形成的濾渣的壓縮性較大,隨著過濾不斷進行,濾渣不斷增厚,過濾阻力增加很快。
1.4 發(fā)酵液中的蛋白質(zhì)多,即使許多蛋白質(zhì)已從極細的膠體微粒絮凝成微膠團,但膠團往往不到 1 微米,這些膠團在過濾過程中或者堵塞過濾介質(zhì)的毛細孔,或者易穿濾。
上述這些特點導致發(fā)酵液的過濾的過濾效率不高,過濾阻力大,排渣困難,過濾介質(zhì)易堵塞,過濾物料性能變化幅度大。
2 、 發(fā)酵液過濾與復(fù)濾的技術(shù):
根據(jù)發(fā)酵液過濾的上述特性,為了提高發(fā)酵液過濾效率,提高濾液澄明度,提高過濾操作的勞動生產(chǎn)率,減少過濾操作的勞動強度,經(jīng)過對年研究,開發(fā)出如下的新過濾技術(shù):
對霉菌與某些易濾放線菌發(fā)酵液,采用 “精密微孔過濾”
對某些難濾放線菌發(fā)酵液,采用 “助濾 + 精密微孔過濾”
對非常難濾的細菌發(fā)酵液,采用 “絮凝 + 助濾 + 精密微孔過濾”
1.1 助濾:選擇對發(fā)酵液中有效成份不吸附,在過濾壓差作用下,顆粒不變形,顆粒之間、顆粒與過濾介質(zhì)之間無粘附性的粉末作為助濾劑。硅藻土、α纖維素、珍珠巖粉及其它某些粉末可作為發(fā)酵液過濾的助濾劑。助濾方式有兩種:
1.1.1 表面預(yù)涂:過濾介質(zhì)的表面預(yù)涂一層 1~2mm 的助濾層,主要防止過濾介質(zhì)微孔不被蛋白質(zhì)等細小微粒堵塞,使粘性濾渣不直接粘附在過濾介質(zhì)表面,卸渣完全,過濾介質(zhì)清洗方便。
1.1.2 本體助濾:在過濾料液中加進一定比例的助濾劑微粒,由于助濾劑是無壓縮性又有一定多孔性的顆粒,在發(fā)酵液的濾渣層中由助濾劑形成骨架,濾渣的壓縮性顯著減少,過濾阻力也減少,這樣可使難濾的發(fā)酵液與澄明度低的初濾液的復(fù)濾能維持相當時間,如果沒有本體助濾,由于濾層壓縮性能很大,濾速下降很快,過濾過程就無法繼續(xù)進行。
1.2 絮凝:對于細菌發(fā)酵液,即使采用大量助濾劑作預(yù)涂與本體助濾,也難以進行有效過濾, 因為細菌發(fā)酵液中的菌體都是不超過 0.5 微米的微粒,不僅微粒小,而且壓縮性也大,在過濾過程中,在濾液的流速作用下,這些微粒還會在助濾劑堆積層孔隙中位移,最后大部分在過濾介質(zhì)表面被截留,形成一層比阻很大的濾渣層。這種濾渣層的存在使過濾速度極慢,過濾難以正常進行。
對于這類發(fā)酵液,過濾之前應(yīng)進行絮凝預(yù)處理,通過絮凝劑與菌絲體或其它膠體物質(zhì)之間的正負電荷吸引以及吸附等機理,絮凝劑可使這類發(fā)酵液很快產(chǎn)生絮凝作用,使 0.5 微米以下的微粒形成較大的絮凝膠團。經(jīng)過這種絮凝以后,再利用助濾劑,就可以做到既濾液清,又濾速較快。
1.3 精密微孔過濾:本文所敘述的精密微孔過濾技術(shù)是剛性的高分子精密微孔過濾技術(shù),它以剛性高分子微孔燒結(jié)管為介質(zhì)進行濾渣過濾,該技術(shù)與其它過濾技術(shù)相比有如下的特色:
1.3.1 剛性的微孔過濾管的毛細孔徑可以做得很小,最小只有 5 μ m ,通過吸附,孔口架橋與表面機械篩濾等機理可以過濾 0.5 微米左右的微粒。
1.3.2 剛性的高分子微孔過濾管有一定的抗拉強度,可承受大于 0.6Mpa 的內(nèi)壓,利用壓縮氣體的快速反吹法,可以很方便卸除微孔管表面的較粘的濾渣,如用濾布等柔性介質(zhì),就不能用這種簡易的反吹法卸渣。
1.3.3 采用“氣—液反吹法”可以將堵塞在微孔過濾管孔口與內(nèi)部的大部分微粒反吹出來,微孔過濾管使用壽命比濾布等長得多,一般至少可用一年以上。
1.3.4 高分子微孔過濾管的化學性能非常優(yōu)越,耐各種酸、堿以及 70 ℃以下的大部分有機溶劑;對于已經(jīng)嚴重堵塞,無法“氣—水反吹”的微孔管,可以用堿液浸泡,進行化學再生。
1.3.5 以高分子微孔過濾管為過濾介質(zhì)的精密微孔過濾機均有氣動的能排干渣的大排渣底蓋,卸渣時不需繁重體力勞動。
1.3.6 全部密閉操作。
1.4 “絮凝 + 助濾 + 精密微孔過濾”的實驗:
特以肌苷發(fā)酵液進行過濾試驗:肌苷是細菌發(fā)酵液,以 SX 蛋白質(zhì)絮凝劑進行絮凝,以珍珠巖作助濾,以精密微孔過濾管作過濾介質(zhì)。
肌苷發(fā)酵液絮凝液的助濾試驗數(shù)據(jù)
過濾壓差 (Mpa) |
0.1 |
0.1 |
0.1 |
0.1 |
珍珠巖粉預(yù)涂層厚度 (mm) |
3 |
3 |
3 |
1.5 |
本體助濾的珍珠巖投量 (%) |
4 |
2 |
0 |
0 |
濾渣層平均比阻 (L/m2) |
4*1013 |
1.13*1014 |
1.78*1015 |
1.4*1016 |
濾渣體積與濾液體積之比 |
0.24 : 1 |
0.15 : 1 |
0.02 : 1 |
0.02 : 1 |
在 1 小時之內(nèi)平均濾速 (L3/m2h) |
86 |
65 |
45 |
16 |
濾渣層厚度 (mm) |
21 |
10 |
1 |
1 |
表中給出肌苷發(fā)酵液的絮凝液 “助濾 + 精密微孔過濾”的實驗數(shù)據(jù)。
由表中數(shù)據(jù)可知,本體投加量從 0 增加到 4% ,平均濾速成直線增加,但是濾渣厚度也成倍增加。一般投加量不應(yīng)超過 2% 。
3 、 新過濾技術(shù)的應(yīng)用前景:
“助濾 + 精密微孔過濾”已用于幾種放線菌發(fā)酵液的過濾與濾液復(fù)濾,如柔紅霉素、鹽霉素、阿維菌素、葡萄糖酸鈣發(fā)酵液,也成功用于酶法生產(chǎn)的丙烯酰胺液體的精密過濾,這些應(yīng)用都明顯提高濾液的澄明度,改善后步操作的效率與質(zhì)量。
本方法對 Vc 發(fā)酵液,肌苷發(fā)酵液、桿菌肽等細菌發(fā)酵液等也成功進行了實驗,證明完全可用于這些發(fā)酵液過濾,在進行異亮氨酸發(fā)酵液試驗時,特地讓發(fā)酵液在 35 ℃條件下自溶一星期,使發(fā)酵液菌絲基本自溶,這種發(fā)酵液采用本技術(shù)能很順利地過濾,將這種過濾液繼續(xù)提取產(chǎn)品,最后結(jié)果表明,產(chǎn)品收率沒有下降。
4 、 精密微孔過濾機用于發(fā)酵液或濾液的計算:
精密微孔過濾應(yīng)用于發(fā)酵液過濾或濾液復(fù)濾,應(yīng)先進行絮凝與助濾的系統(tǒng)試驗,確定最佳絮凝劑品種與投加量,助濾劑預(yù)涂厚度與本體投加量等參數(shù)后,然后通過過濾實驗,取得工程設(shè)計參數(shù)。工程設(shè)計參數(shù)中最關(guān)鍵是濾渣層平均比阻 α與最佳過濾壓差 Dp 佳 0 取得這兩參數(shù)之前,先應(yīng)測得平均比阻與壓差之間的關(guān)系式:
然后計算 Dp 佳
然后由式 (1) :
有了 α佳、 Dp 佳,就可按下式計算過濾的平均濾速 W :
以上諸式中:
Dp —過濾壓差 (Mpa) Dp 佳—最佳過濾壓差 (Mpa)
α—濾渣層平均比阻 (1/m2) α佳—最佳壓差下濾渣層平均比阻 (1/m2)
S —濾渣層壓縮指數(shù) α 0 、λ—系數(shù)
t —過濾時間 (s) W —在某一時間 t 內(nèi)平均濾速 (m3/m2h)
μ—濾液粘度 (Ns/m2) C —濾液體積對濾液體積之比 (~)
比阻 α、α 0 、λ、 S 的測試方法見作者另一論文, C 在測α過程中就可計算所得,μ需專門粘度測定。
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